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如何進行細菌濃度的測定

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如何進行細菌濃度的測定

進行細菌濃度的測定的方法有:

1、取已經培養好的細菌瓊脂平板,加入2ml新鮮的生理鹽水,用L棒輕輕將菌落刮下,收集在1.5mlEP管中。

2、取10μl菌液塗布在載玻片上,乾燥固定後進行格蘭染色鑑定。

3、將EP管置於離心機,5000RPM離心5min。

4、棄上清,取1ml完全無抗1640培養基重懸細菌;取新的1.5mlEP管,加入950μl生理鹽水,及50μl菌液,混勻(稀釋20倍)。

5、在分光光度計上測定OD值:以生理鹽水作為空白對照調零,測定稀釋20倍的菌液的吸光度,若OD值在0.3-0.7的範圍內,則按照1OD=1.0×109CFU/ml計算原始菌液濃度。若OD值大於0.7且小於1,則取原始菌液進行40倍稀釋後測定吸光度值。若OD值小於0.3,則取原始菌液進行10倍或5倍稀釋後測定吸光度值。務必將OD值調整到0.3-0.7的範圍內。