酶切位點怎麼選擇

酶切位點的距離太小（小於10bp），影響限制性內切酶對切點的識別，不利於空載體的雙酶切。

方法：

1、一般目的基因用於克隆表達的情況下，酶切位點的選擇要考慮到：目的基因片段內部不含有所選的酶切位點（不然鑑定陽性重組子雙酶切時會將目的基因切斷）

2、實驗後繼應用的所有載體(真核、原核、酵母、昆蟲)都儘可能含有所選的酶切位點．並且要保證在載體上的插入方向正確（定向克隆）。（不然換載體表達時，還要重新設計引物，以引進新的酶切位點。）

3、儘可能選比較常用的酶切位點。